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旋轉(zhuǎn)搖床對癌細(xì)胞凋亡作用的研究?。?!

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2021-04-19 08:49【

     乳 腺癌細(xì)胞凋亡水平上升時,包括 miR?145?5p 在內(nèi) 的多種 miRNA 水平上升 。miR?145?5p 與 ATF1 和乳腺癌細(xì)胞凋亡之間的 聯(lián)系,本研究旨在探討 miR?145?5p 靶向調(diào)控 ATF1 對乳腺癌細(xì)胞 MCF7 凋亡的影響。胎 牛 血 清(Thermo 公 司)、1640 培養(yǎng)基(GE 公司)、pmiR?RB?Report 質(zhì)粒 (上海欽誠)、HiPerFect Transfection Reagent(德國 凱杰),P21、BAX、ATF1、BCL?2、Caspase9、Tubulin 抗體(英國 ABCAM),蛋白裂解液(碧云天)、山羊 抗大鼠 IgG 和山羊抗兔 IgG(H+L)(艾美捷)、PBS (上海生工)、蛋白酶抑制劑(上海睿鉑賽)、青鏈霉 素 混 合 液(上 海 索 寶)、ClonExpress II One Step Cloning 試劑盒(南京諾唯贊),Luciferase 熒光素酶 報告檢測試劑盒(武漢艾美捷),U6 和 miR?145?5p 熒光定量 PCR 引物、qPCR 和 miRNA 反轉(zhuǎn)錄試劑 盒(廣 州 復(fù) 能 基 因),miRNA 快 速 提 取 試 劑 盒 (HaiGene)、Western blot 裝置(美國伯樂公司),細(xì) 胞培養(yǎng)箱、生物安全柜購和酶標(biāo)儀(美國 Thermo)、 微量加樣器(法國 Gilson)、冷凍離心機(jī)(德國 Ep? pendorf)、旋轉(zhuǎn)搖床(江蘇海門市其林貝爾)、脫色 搖床(大龍興創(chuàng))、熒光定量 PCR 儀(美國 ABI); miR?145?5p 序列來自 miRBase,miR?145?5p 模似物 和 miR?145?5p 抑制物由上海生工生物工程股份有 限公司合成。



    miRNA 是 內(nèi) 源 性 22nt 非 編 碼 RNA,其 靶 向 mRNA 用于切割或翻譯抑制。許多 miRNA 調(diào)節(jié)程 序性細(xì)胞死亡,包括細(xì)胞凋亡、自噬和壞死性凋 亡。一系列研究表明,miR?145?5p 是幾種腫瘤 的腫瘤抑制因子,如結(jié)腸癌 、乳腺癌、和前 列腺癌 ,而 miR?145?5p 抑制乳腺癌的機(jī)制尚未 報道。ATF1 是構(gòu)成基本亮氨酸拉鏈轉(zhuǎn)錄因子的 亞家族的一員,介導(dǎo)各種細(xì)胞外信號的轉(zhuǎn)錄反應(yīng), 它參與細(xì)胞活力和細(xì)胞轉(zhuǎn)化 。





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