1 材料和方法 

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 

健康雄性 Wistar 大鼠，體質(zhì)量 180~220 g，由北京維通利華動物實(shí)驗(yàn)中心提供，動 物合格證編號：SCXK（京）2016-001。飼養(yǎng)于天津市南開醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動物中心。 

1.2 實(shí)驗(yàn)主要試劑與儀器 

末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移 酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記測定（Tunel）試劑盒購自瑞 士 Roche 公司；Akt 抗體、p -Akt 抗 體、Bax 抗 體、 Bcl -2 抗 體 、Caspase -3 抗 體 均 購 自 Cell signal technology 公司；二喹啉甲酸（BCA）蛋白濃度測定試 劑盒（Thermo 公司）、渦旋振蕩儀（其林貝爾儀器制造有限公司）、低溫高速離心機(jī)（Eppendorf 公司）、電 泳儀（美國 GE 公司）、轉(zhuǎn)膜儀（美國 GE 公司）。 

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

大鼠實(shí)驗(yàn)期間保持 自由飲水和進(jìn)食，飼養(yǎng)環(huán)境溫度為（24±1）℃，濕度 為 55%±5%，實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性喂養(yǎng) 1 周。根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表將 115 只大鼠分為空白組 （15 只）、假手術(shù)組 （20 只）、痰濁組（20 只）、血瘀組（30 只）、痰瘀互結(jié) 組（30 只）。空白組、假手術(shù)組和血瘀組用普通飼料 喂養(yǎng) 8 周。痰濁組和痰瘀互結(jié)組用高脂飼料喂養(yǎng) 8 周，第 49 天目內(nèi)眥取血，剔除血脂未升高的大鼠。 第 54 天，血瘀組和痰瘀互結(jié)組行冠狀動脈左前降 支結(jié)扎術(shù)，假手術(shù)組只穿線，不結(jié)扎。實(shí)驗(yàn)過程中剔 除不符合標(biāo)準(zhǔn)的大鼠，并記錄死亡情況。8 周末大鼠腹腔注射 10% 水合氯醛麻醉，腹主動脈取血后生理鹽水沖洗心 臟，剪取心臟，-80 ℃冰箱保存待測。

2 結(jié)果

空白組和假手術(shù)組未見明顯細(xì)胞 凋亡，與假手術(shù)組相比，痰濁組、血瘀組和痰瘀互結(jié) 組大鼠心肌細(xì)胞凋亡數(shù)目增加，痰濁組大鼠心肌可 見少量細(xì)胞凋亡，血瘀組和痰瘀互結(jié)組大鼠心肌組 織存在大量細(xì)胞凋亡。與假手術(shù)組相比，空白組大鼠 Akt、Bcl-2、Bax 和 Caspase-3 蛋白表達(dá)水 平和 Bax/Bcl-2 比值無統(tǒng)計學(xué)差異，p-Akt 蛋白表達(dá) 水平明顯升高（P＜0.01）；血瘀組和痰瘀互結(jié)組大鼠 Akt、p-Akt 和 Bcl-2 蛋白表達(dá)水平明顯降低（P＜0.05 或 P＜0.01）；Bax 和 Caspase-3 蛋白表達(dá)水平明顯升 高（P＜0.05 或 P＜0.01）。

3 討論 

CHD 屬中醫(yī)“胸痹”范疇，《金匱要略·胸痹心痛 氣短脈證治》中記載：“師曰：夫脈當(dāng)取太過不及，陽 微陰弦，即胸痹而痛，所以然者，責(zé)其極虛也。”提出 胸痹的病機(jī)為“陽微陰弦”，中醫(yī)證型多屬本虛標(biāo) 實(shí)，虛實(shí)夾雜的復(fù)合證型。《癥因脈治》云：“胸痹之 因，飲食不節(jié)，饑飽損傷，痰凝血滯，中焦混濁，則悶 食悶痛之癥作矣。”表明“痰濁”和“血瘀”為 CHD 重 要的致病因素。

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