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其林貝爾

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糖尿病腎病發(fā)病過(guò)程的機(jī)制分析(其林貝爾搖床

返回列表 來(lái)源:未知 發(fā)布日期:2019-12-18 09:36【

糖尿病腎病是糖尿病患者常見(jiàn)的微血管并發(fā) 癥,病變?cè)缙诔霈F(xiàn)微量白蛋白,隨病情進(jìn)展,會(huì)出現(xiàn) 腎小球肥大、腎小球硬化以及腎間質(zhì)纖維化,是終末 期腎病的主要病因。西醫(yī)治療糖尿病腎病主要 是控制高血糖、高血壓以及減少蛋白尿等對(duì)癥治療, 目前為止還沒(méi)有能完全阻斷糖尿病腎病發(fā)生發(fā)展的 藥物,因此迫切需要研發(fā)更有效的藥物來(lái)預(yù)防或減 緩其進(jìn)展。


1 實(shí)驗(yàn)資料 


1. 1 儀器

熒光定量 PCR 儀( 美國(guó) Applied Biosystems 公司) ; 流式細(xì)胞儀( 上海碧迪醫(yī)療器械有限公 司) ; 成像系統(tǒng)( 美國(guó) Bio - Rad 公司) ; 低溫高速離 心機(jī)( 長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司) ; 電子天平 ( 上海精密儀器儀表有限公司) ; 移液器( 德國(guó) eppendorf 公司) ; 轉(zhuǎn)膜儀( 美國(guó) Bio - Rad 公司) ; 電泳 儀( 中國(guó)北京六一儀器公司) ; 轉(zhuǎn)移脫色搖床( 江蘇其林貝爾儀器制造有限公司) 。

1. 2 藥品與試劑

參芪補(bǔ)胰方組方: 生黃芪 30 g、太子參 15 g、麥冬 15 g、五味子 6 g、石斛 15 g、生熟地 黃各 9 g、黃連 3 g、赤白芍各 9 g、川芎 9 g、丹參 9 g, 制備成含生藥 2 g /mL 的藥液,由上海市中西醫(yī)結(jié)合 醫(yī)院中藥房提供。

1. 3 動(dòng)物

SPF 級(jí) SD 雄性大鼠 18 只,體質(zhì)量 180 ~ 200 g,購(gòu)自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司,動(dòng) 物合格證號(hào): 2015000542372。

1. 4 分組、造模及干預(yù)

18 只雄性 SD 大鼠適應(yīng)性 飼養(yǎng) 1 周后,隨機(jī)抽取 6 只設(shè)為正常組,予普通飲食 飼養(yǎng); 其余 12 只予高脂高糖飼料喂養(yǎng) 6 周,證實(shí)大 鼠存在胰島素抵抗后,以 30 mg /kg STZ( 溶于 0. 1 mmol/L 檸檬酸緩沖液,pH 4. 4) 于大鼠左側(cè)下腹部 腹腔注射,正常組注射相同給藥容量的檸檬酸緩沖 液。72 h 后剪尾端取血測(cè)末梢血血糖,血糖≥16. 7 mmol /L 判定為高血糖,未達(dá)標(biāo)者再以 30 mg /kg STZ 注射 1 次,此后每 3 d 檢測(cè)血糖 1 次,血糖穩(wěn)定≥ 16. 7 mmol /L 為糖尿病模型造模成功。再繼續(xù)喂 養(yǎng),記錄 24 h 尿量,計(jì)算尿白蛋白排泄率大于 30 mg 為糖尿病腎病造模成功。將造模成功的 12 只大鼠 標(biāo)號(hào),隨機(jī)等分為模型組和參芪補(bǔ)胰方組,參芪補(bǔ)胰 方組給予 10 mL /kg 參芪補(bǔ)胰方藥液灌胃,模型組和 正常組給予等量生理鹽水灌胃,均連續(xù) 12 周。

1. 5 血糖及尿白蛋白水平檢測(cè)

末次灌胃結(jié)束后, 采集 3 組大鼠 24 h 尿液,采用考馬斯亮藍(lán)法檢測(cè) 24 h 尿白蛋白水平; 大鼠禁食 12 h,以 10% 水合氯醛 1. 0 mL 腹腔注射麻醉,腹主動(dòng)脈采血,室溫靜置 1 h,3 000 r/min 離心 10 min,分離血清檢測(cè)血糖水平。

1. 6 腎形態(tài)學(xué)觀察

摘除各組大鼠腎臟,生理鹽水 沖洗干凈,多聚甲醛固定后,脫水、包埋、切片,進(jìn)行 PAS 染色以及 Masson 染色。


2 結(jié) 果

大鼠一般情況及血糖、尿白蛋白水平比較 造模成功大鼠均出現(xiàn)多飲、多尿、多食、消瘦現(xiàn)象,正 常組大鼠則沒(méi)有什么變化,參芪補(bǔ)胰方組大鼠較造 模組大鼠多飲、多尿、多食、消瘦等現(xiàn)象有明顯改善。 模型組大鼠血糖及 24 h 尿蛋白水平均明顯高于正 常組( P 均 < 0. 05) ; 參芪補(bǔ)胰方組大鼠血糖及 24 h 尿蛋白水平均明顯低于模型組( P 均 < 0. 05) 。見(jiàn) 表 1。

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3 討 論 


糖尿病腎病是導(dǎo)致糖尿病患者終末期腎病和慢 性腎衰竭的主要原因,全世界大約 40% 的糖尿病患 者會(huì)發(fā)生糖尿病腎病。糖尿病腎病的發(fā)生機(jī)制 比較復(fù)雜,其中炎癥反應(yīng)在其發(fā)展和發(fā)展中起著至 關(guān)重要的作用。相關(guān)研究證實(shí),大量的促炎因子包括 TNF - α、IL - 18、IL - 1β 和 MCP - 1 在糖尿病腎 病中特異表達(dá),引發(fā)炎癥瀑布反應(yīng),產(chǎn)生大量氧自由 基,導(dǎo)致糖尿病腎病患者腎臟結(jié)構(gòu)破壞。因此, 阻斷炎性激活通路可能對(duì)防治糖尿病腎病具有重要 意義。




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